O ácido linoleico conjugado (cla) tem atraído a...o ácido linoleico conjugado (cla) tem atraído atenção nas últimas décadas devido aos seus benefícios associados à saúde. o cla é um produto intermediário da via de biohidrogenação do ácido linoleico em bactérias. a biotransformação do ácido linoleico em cla por micro-organismos é um processo industrial potencialmente útil. diversas espécies bacterianas capazes de converter eficientemente o ácido linoleico em cla foram amplamente relatadas na literatura, dentre elas o lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus. pesquisas recentes propuseram a hipótese de um sistema enzimático multi-componente constituído em três enzimas envolvidas no processo de biohidrogenação do ácido linoleico. neste projeto, o seqüenciamento do genoma de l. delbrueckii subsp. bulgaricus 2230 revelou apenas o gene capaz de codificar a enzima oleato hidratase (olea). aliado a estudos prévios com a mesma linhagem, estes achados sugerem potencial promiscuidade catalítica da oleato hidratase presente no genoma desta cepa. o gene olea de l. delbrueckii subsp. bulgaricus 2230 foi identificado, clonado em vetores de expressão e introduzidos na linhagem parental l. delbrueckii subsp. bulgaricus 2230 como cópia extra e sob controle de promotor constitutivo e na linhagem receptora escherichia coli bl21(de3) sob controle de um promotor induzível. a construção inserida em e. coli será utilizada para ensaios in vivo de expressão heteróloga, bem como para posterior purificação da proteína recombinante a ser utilizada em ensaios in vitro para caracterização da atividade enzimática. a linhagem recombinante de l. delbrueckii subsp. bulgaricus expressando olea constitutivamente será utilizada para análises fenotípicas, dentre as quais a avaliação do potencial de produção de cla em meio de cultura padrão para cultivo de lactobacillus sp. comparada a produção obtida em matriz soro de leite fermentado.