Os processos que geram a manutenção da homeosta...os processos que geram a manutenção da homeostasia de tecidos e órgãos são indispensáveis para manter viável o organismo humano. esses processos estão intimamente relacionados com a ativação e ação das células-tronco adultas (cta). no entanto, a função dessas células é progressivamente alterada no envelhecimento devido aos processos fisiológicos, patológicos e a exposição ao meio que as danifica ou as torna senescentes. o acúmulo de cta danificadas ou senescentes contribui para a perpetuação de inúmeras patologias, doenças crônicas e degenerativas, de difícil tratamento, que reduz a qualidade de vida do paciente e geram impactos sociais e econômicos. desenvolver métodos que aumentem a resistência das cta contra danos é uma estratégia terapêutica da medicina regenerativa. elaborar um secretoma (conjunto complexo de biomoléculas secretadas que influenciam processos biológicos) das cta mesenquimais com caráter citoprotetor e citoreparador é uma biotecnologia com potencial terapêutico anti-dano e anti-senescência celular. dessa forma, o presente trabalho tem como objetivo avaliar o efeito do secretoma de cta do tecido adiposo humano (asc - adipose stem cells, do inglês) submetidas a diferentes agentes citotóxicos sobre a resistência celular contra danos e senescência. para isso, um grupo de asc será foto estimulado com radiação ultravioleta a ou b ou exposto ao peroxido de hidrogênio com o intuito de gerar danos e estimular a secreção de biomoléculas sinalizadoras de dano, de ativação das defesas e de reparo celular. o meio condicionado com estas biomoléculas será coletado e submetido a diferentes centrifugações. em seguida, um novo grupo de asc e um grupo de dsc (dermal stem cells, do inglês) serão previamente tratados com o meio condicionado para, posteriormente, serem estimuladas com os agentes citotóxicos. por fim, as células serão submetidas a analises de imunocitoquimica, coloração celular, western blot e pcr para verificar viabilidade celular, integridade celular, ativação das defesas e de reparo celular e o fenótipo senescente. o meio condicionado será caracterizado por elisa. objetivo geral: avaliar o efeito do secretoma de asc humanas (adipose stem cells – do inglês) submetidas a diferentes agentes citotóxicos (radiação ultravioleta a ou b – ruva ou ruva, respectivamente, e peróxido de hidrogênio – h2o2) sobre a resistência celular contra danos e a senescência. objetivos específicos: • isolar e expandir asc e dsc em cultura. • padronizar uma dose citotóxica de h2o2 para asc e dsc. • padronizar uma dose citotóxica de ruva ou ruvb para asc e dsc. • obter o meio condicionado de asc expostas ou não expostas aos agentes citotóxicos. • avaliar a integridade celular de asc e dsc tratadas com o secretoma de asc expostas aos agentes citotóxicos. • avaliar a ativação das defesas celulares de asc e dsc tratadas com o secretoma de asc expostas aos agentes citotóxicos. • padronizar uma metodologia que induza a senescência celular precoce in vitro. • avaliar o fenótipo senescente nas asc e dsc tratadas ou não com o meio condicionado com o secretoma de asc expostas e não expostas aos agentes citotóxicos. • caracterização do secretoma de asc expostas e não expostas aos agentes citotóxicos.