Alguns fatores ambientais, como as concentrações de íons e a pressão osmótica podem afetar a ativação dos espermatozoides dos peixes, a duração da sua motilidade e as velocidades do seu deslocamento. o presente estudo teve por objetivo avaliar o efeito de soluções ativadoras com diferentes osmolaridades sobre o sêmen crioconservado do jundiá rhamdia quelen (quoy & gaimard, 1824). para tanto, amostras de sêmen foram congeladas com solução crioprotetora (100ml/l metanol, 50g/l frutose, 50g/l leite em pó), e após descongelamento o efeito de duas soluções ativadoras foi avaliado. as soluções ativadoras utilizadas foram bicarbonato de sódio (nahco3) e cloreto de potássio (kcl), nas osmolaridades 120, 200, 300 e 400 mosm l-1. a ativação com água deionizada foi utilizada como tratamento controle. o sêmen de reprodutores foi coletado em campo, sem o uso de indução hormonal, no mês de junho/2019. foram utilizados machos adultos selvagens (n =4) em idade reprodutiva, de um plantel de reprodutores provenientes de captura do rio uruguai. as amostras de sêmen fresco foram caracterizadas individualmente e posteriormente foi preparado um pool, que foi diluído na proporção 1:4 (sêmen: solução crioprotetora), envasado em pallets de 0,25 ml, resfriado e congelado em vapor de nitrogênio, e posteriormente foi armazenado em botijão de nitrogênio líquido. para a descongelação os pallets foram imersos em água a 24 °c por 10 s. a análise da motilidade foi realizada com o software computacional de análise espermática (casa). o tratamento utilizando kcl produziu as maiores taxas de motilidade e velocidade curvilínea, enquanto a velocidade em linha reta apresentou maiores valores para os tratamentos utilizando nahco3. as soluções ativadoras contendo k+ e na+ em concentrações a partir de 300 mosm l-1 afetaram negativamente a motilidade de sêmen crioconservado de r. quelen reduzindo de forma severa a motilidade dos espermatozoides.