A necessidade de se explorar novas fontes de energia renovável e limpa vem exigindo o desenvolvimento de biocombustíveis, por serem considerados uma alternativa promissora aos combustíveis tradicionais. nesse contexto, as lemnas vêm ganhando interesse em pesquisas, por não competirem com culturas alimentícias e terras produtivas para produção de etanol. o objetivo deste trabalho foi a valorização da biomassa de lemnas (landoltia punctata), produzidas em sistema de tratamento de esgoto, através de hidrólise enzimática do amido e celulose em açúcares fermentescíveis. para tal, a biomassa seca (55 ºc por 24 horas) e triturada foi caracterizada quanto à umidade (6,57%), amido (6,53%), celulose (12,83%), proteína bruta (34,27%) e cinzas (10,54%). os experimentos de hidrólise enzimática foram realizados em modo batelada visando o estudo da etapa de sacarificação. foi então utilizado um planejamento tipo plackett-burman (12 ensaios, 6 variáveis e triplicata no ponto central), cujas variáveis estudadas foram: ph (3,0 a 6,0), temperatura (45 a 65 ºc), concentração de spirizyme fuel (0,1 a 0,3% v/m, em relação à biomassa), concentração de pectinex ultra afp (0 a 0,1% v/m, em relação à biomassa), concentração de cellic ctec2 (0 a 6% v/m, em relação à biomassa) e concentração de cellic htec2 (0 a 0,5% v/m, em relação à biomassa). a variável resposta foi a concentração de glicose. depois de observadas as variáveis significativas, que foram a temperatura e a concentração de cellic ctec2, realizou-se planejamento fatorial completo 22, com triplicata do ponto central e totalizando 7 experimentos. a partir dos resultados obtidos as condições da sacarificação foram definidas: ph 6,0, temperatura de 45 ºc, concentração de spiryme fuel 0,1% (v/m) e de cellic ctec2 6% (v/m) por 2 horas. nestas condições, o hidrolisado apresentou ph de 5,9, concentração de glicose de 6,02 g/l e 3,52 ºbrix. também foi avaliado o acúmulo de amido quando a espécie de lemnas estudada (landoltia punctata) era submetida a privação de nutrientes, obtendo-se até 5 vezes a quantidade inicial. estes resultados indicam que a biomassa de lemnas tem potencial para produzir quantidades significativas de amido, que juntamente com sua fração de celulose, podem ser convertidos em etanol.