As proteínas myb constituem uma importante família de fatores de transcrição e desempenham, em plantas, funções regulatórias no desenvolvimento e nas respostas de defesa. exemplo importante desta família é a proteína atmyb30 de arabidopsis thaliana que está envolvida no início da morte celular, durante o processo de resposta de hipersensibilidade e respostas de defesa vegetal. no processo de sinalização celular, o óxido nítrico pode regular a ligação das proteínas myb ao dna de diversas maneiras, entre elas através da s-nitrosilação. dessa forma, o objetivo deste trabalho foi caracterizar e avaliar a ocorrência da modificação pós-traducional s-nitrosilação no fator de transcrição atmyb30 de arabidopsis thaliana, sua interação com o dna e o efeito estrutural destes fatores. mutagênese sítio-dirigida foi usada para obter os mutantes c49a, c53a e c49ac53a. o domínio de ligação ao dna de atmyb30 foi capaz de ligar-se ao dna na forma ativa, assim como os seus simples mutantes em cisteína, o que não ocorreu com o duplo mutante, comprovando a importância destes aminoácidos altamente reativo na formação do complexo. além disso, foi confirmada a s-nitrosilação destas proteínas pela técnica de biotin-switch, modificação que provavelmente impediu a formação dos complexos dna-proteína quando na presença de doadores de no nos testes de retardamento de migração eletroforética. utilizando o dicroísmo circular foi observado que o no, possivelmente através da s-nitrosilação, influencia estruturalmente atmyb30, alterando seu conteúdo de estrutura secundária, porém com certa reversibilidade ao conteúdo inicial por efeito de um agente redutor. quando comparadas, a cisteína 49 parece ser mais importante nesta modificação estrutural, ao passo que a cisteína 53 apresenta maior afinidade com a molécula de dna. foi possível identificar e confirmar por espectrometria de massa maldi-tof a s-nitrosilação no resíduo de cisteína 53. nos ensaios de desnaturação térmica a proteína selvagem apresentou uma temperatura de desnaturação (tm) de 38,26 °c enquanto que os mutantes c49a e c53a foram menos estáveis estruturalmente, apresentando uma menor tm de 32,43 °c e 31,25 °c, respectivamente. já sob o efeito da s-nitrosilação, o perfil de desnaturação térmica da atmyb30 selvagem apresentou um leve aumento de 3,69 ± 1,01°c na tm quando comparado à proteína não s-nitrosilada, assim como para c49a de 33,08 °c a 39,82°c; ~6 °c. apenas para o mutante c53a a tm reduziu na presença do doador de no snog, apresentando valores de 29.49°c a 23.15°c. assim, a s-nitrosilação do resíduo c49 (presente no mutante c53a) promoveu o efeito mais pronunciado na sensibilidade térmica, enquanto a maior estabilidade térmica quando s-nitrosiladas foi observada em atmyb30 selvagem e mutante c49a, sugerindo que o resíduo c49 pode ser responsável pelas modificações estruturais causadas pela adição do no à proteína. quanto ao efeito do dna nos espectros de fluorescência de atmyb30, foi observada uma redução de intensidade de fluorescência e uma alteração no comprimento de onda máximo quando na ligação entre atmyb30 e o dna, inclusive para as simples mutantes, comprovando a alteração estrutural causada pela ligação devido ao enovelamento da proteína. finalmente, utilizando a técnica de dnase footprint foi possível confirmar a sequência de ligação do dna à atmyb30.