Objetivou-se isolar e identificar bactérias do gênero bacillus sp. oriundas do sistema de cultivo superintensivo com flocos microbianos de litopenaeus vannamei e avaliar seu potencial nos parâmetros de qualidade de água, zootécnicos e imunológicos quando adicionados na água e em dietas práticas. os bacillus spp. isolados foram avaliados in vitro quanto a capacidade de inibir patógenos, atividade antagonista e produção de protease. in vivo, os bacillus spp. foram adicionados na água para avaliar a formação e manutenção de flocos microbianos no cultivo de pós-larvas e depois foram incorporados em dietas formuladas, afim de verificar o desempenho zootécnico e parâmetros hemato-imunológicos do l. vannamei durante 42 dias. foram isoladas quatro bactérias do sistema superintensivo de flocos microbianos (bacillus thuringiensis cpqba 571-12 drm 06, bacillus licheniformis cpqba 571-12 drm 07, bacillus licheniformis cpqba 571-12 drm 08 e bacillus cereus cpqba 571-12 drm 09). o bacillus licheniformis cpqba 571-12 drm 07 foi o único isolado que apresentou característica inibitória in vitro frente ao patógeno v. alginolyticus com halo de inibição de 20 mm de diâmetro. todos os isolados foram capazes de produzir protease e não apresentaram atividade antagonista entre eles. para o ensaio de formação e manutenção de agregados microbianos gerados no sistema superintensivo de cultivo de pós-larvas foi observada diferença significativa (p=0,017) na contagem microbiológica da água no sétimo dia de ensaio, onde a contagem total de vibrio spp. na água foi inferior nos grupos tratados com bacillus spp. (1×104 ufc.ml-1) e com o produto comercial comambio (1×104 ufc.ml-1) do que no controle, não houve diferença estatística na contagem total de bactérias heterotróficas viáveis (p=0,62). já no ensaio de engorda a suplementação com bacillus spp. não afetou o desempenho zootécnico dos camarões. entretanto nos parâmetros imunológicos houve diferença significativa (p<0,05), as cepas de bacillus spp. foram capazes de aumentar a contagem total de hemócitos, o título aglutinante do soro, as proteínas totais no soro e diminuir a atividade da fenoloxidase (po) da hemolinfa. também foi observado um aumento (p<0,05) na produção intracelular de ânion superóxido estimulados pela laminarina (&#946;-1,3 glicanas) e pma (phorbol myristate acetate) comparados ao basal. conclui-se que as bactérias gram-positivas, bacillus spp. isoladas dos bioflocos microbianos, são importantes para o cultivo de l. vannamei e para a manutenção da saúde e crescimento, podendo ser utilizadas como probiótico ou como biocontroladoras em águas de sistemas de cultivos superintensivos