A grande diversidade de metabólitos secundários produzidos por basidiomicetos, especialmente aqueles cultivados in vitro, tem ampliado o campo da biotecnologia visando à produção de compostos antimicrobianos. o objetivo desse estudo foi analisar os extratos de isolados do fungo pisolithus microcarpus (cooke e massee) g. cunn. coletados em duas áreas distintas (degradada pela exploração de carvão e não degradada) quanto a sua capacidade de inibir o crescimento de bactérias potencialmente patogênicas. inicialmente os fungos foram cultivados em meio merlin norkrans modificado (mnm) durante o período de 30 dias. após verificado crescimento, foi feita a extração metanólica do micélio e do meio de cultura. o solvente foi evaporado utilizando evaporador rotatório e o extrato resultante foi particionado com acetato de etila e butanol. os ensaios de difusão em disco foram feitos utilizando os extratos metanólicos e as frações frente a seis estirpes bacterianas: staphylococcus aureus (atcc 25923 e atcc 6538p), escherichia coli (atcc 25922 e atcc 8739), pseudomonas aeruginosa (atcc 27853) e enterococcus faecalis (atcc 29212). as placas foram incubadas a 37 ºc por 24 h e a atividade antibacteriana determinada pela formação de halos de inibição no entorno dos discos. um dos isolados coletado na região carbonífera de santa catarina demonstrou atividade antibacteriana frente à s. aureus, pela formação de halos de 18 mm de diâmetro e frente à p. aeruginosa, com halos de 17 mm de diâmetro. para a separação dos compostos presentes nas frações ativas foi realizada cromatografia em camada delgada, utilizando diversos sistemas de solventes. as análises qualitativas de alcaloides, flavonoides e esteroides indicaram a presença de flavonoides nos extratos, enquanto a análise quantitativa de fenólicos, flavonoides, dpph e potencial redutor demonstrou a baixa capacidade antioxidante do fungo. os espectros de ressonância magnética nuclear e de infravermelho demostraram que a fração acetato de etila contém hidrocarbonetos aromáticos, aldeídos e hidrogênios ligados a carbonos e oxigênios, características indicadoras de triterpenos. os resultados indicam que novos estudos devem ser realizados a fim de identificar esses compostos visando potenciais aplicações biotecnológicas.