Produzidos a partir de fontes renováveis e utilizados para o transporte automotivo, os biocombustíveis tornam-se cada dia mais importantes no balanço energético mundial devido à necessidade de reduzir a dependência da utilização de petróleo, de origem fóssil. no brasil, a maior parte da produção de bioetanol é obtida diretamente a partir da cana-de-açúcar, porém, na pouco aproveitada biomassa lignocelulósica residual (como bagaço e palha) encontra-se a xilose, o segundo açúcar mais abundante na natureza. a conversão bem sucedida da hemicelulose em etanol combustível com alto rendimento é o fator decisivo para a viabilidade econômica do processo. saccharomyces cerevisiae é um microrganismo altamente efetivo na produção de etanol a partir de hexoses, com elevada produtividade de etanol, alta tolerância a esse produto, e tolerância às condições industriais de produção de álcool combustível, mas incapaz de utilizar açúcares como a xilose. linhagens recombinantes de s. cerevisiae podem constituir uma alternativa interessante para a fermentação da xilose. assim, no presente trabalho, foram usadas linhagens de s. cerevisiae recombinantes capazes de metabolizar xilose, transformadas com o plasmídeo integrativo paur-xkxdhxr, o qual permite a sobre-expressão dos genes das enzimas xilose redutase, xilitol desidrogenase e xilulose cinase. em primeira abordagem, foi realizado um experimento de engenharia evolutiva com uma linhagem contendo apenas o gene do transportador de glicose hxt2 sobre-expresso, permitindo a obtenção de uma linhagem mutante no gene stb5, que codifica um regulador da via das pentoses-fosfato. esta linhagem mutante foi capaz de crescer em xilose tão bem quanto em glicose. em segunda abordagem, usando engenharia genômica, foi deletada uma cópia do gene fps1, o qual codifica um facilitador de glicerol, em uma linhagem industrial selecionada para eficiente fermentação de caldo de cana-de-açúcar, obtendo-se uma linhagem que fermenta a xilose mais eficientemente. nossos resultados revelam que as estratégias empregadas são promissórias para incrementar consideravelmente a produção de etanol a partir de linhagens de s. cerevisiae recombinantes.