a restauração do crescimento do pelo ... a restauração do crescimento do pelo (cabelo) após lesões na pele, como queimaduras, e doenças que causam alopecia, isto é, perda total ou parcial dos pelos, tem sido alvo de estratégias de pesquisas que buscam potenciais tratamentos para induzir a regeneração do folículo piloso, resultando assim em melhor qualidade de vida aos pacientes. no folículo piloso, o processo de regeneração envolve uma população de cts epidermais quiescentes, que são ativadas e estimuladas a sair do seu nicho, proliferar e diferenciar, formando os vários tipos celulares maduros encontrados no folículo. este processo de regeneração requer uma sinalização precisa entre a epiderme e derme (papila dérmica) envolvendo diferentes moléculas, como wnt (wingless-type), shh (sonic hedgehog), notch, bmp (bone morphogenetic protein) e outros padrões de sinalização. pesquisas recentes têm focado na modulação de diferentes vias de sinalização para estimular a regeneração do folículo piloso, através de abordagens como a aplicação de fatores de crescimento e citocinas, silenciamento de rna e o uso de terapia celular com diversos tipos e fontes de células tronco (cts). neste sentido, as células estromais mesenquimais (cems) são uma das grandes apostas da medicina regenerativa para aplicação em futuros tratamentos de diversas doenças e lesões. as cems correspondem a células com capacidade de autorrenovação e potencial de diferenciação em células osteogênicas, condrogênicas e adipogênicas, e liberam inúmeros fatores tróficos. esses fatores secretados pelas cems ativam vias de sinalização complexas, atuando assim na redução da inflamação, no aumento da angiogênese e no controle da diferenciação, proliferação e migração celular de diferentes tipos celulares. a relevância desta sinalização parácrina é destacada em estudos que utilizam o meio condicionado (contendo o secretoma) de diversas fontes de células. análises do meio condicionado de cems mostram a produção de diversos mediadores do processo de reparo, como citocinas, quimiocinas, fatores de crescimento, e moléculas de matriz extracelular. além de fatores solúveis, recentemente, o papel de vesículas extracelulares na comunicação celular em pequenas e grandes distâncias tem sido destacado. as vesículas são secretadas pelas células e, em geral, são carregadas com variadas proteínas, lipídeos e ácidos nucleicos, incluindo mrna, microrna, que, protegidos pela membrana, chegam ativos à célula alvo e modificam o padrão de sinalização intracelular e, consequentemente, o estado fisiológico da célula receptora. dentre as vias de sinalização, o padrão wnt é considerado o regulador master durante a morfogênese do folículo piloso. as moléculas de wnt podem ser secretadas de forma solúvel e também dentro de vesículas extracelulares, e, ao se ligarem ao seu receptor, ativam uma cascata de sinalização que ocasiona a entrada de beta-catenina no núcleo, ativando assim diferentes genes. a perda da propriedade de formar pelos está associada com a sinalização wnt/beta-catenina. outros padrões de sinalização, como o padrão hippo, vêm sendo relacionados em processos de regeneração em diversos órgãos, incluindo a pele. o padrão de sinalização hippo, inicialmente descrito em drosophila, regula a proliferação celular, tamanho do órgão e sobrevivência, e está integrada com a sinalização de wnt. o maior gene alvo da cascata hippo é fator de transcrição yap (yes-associated protein) e taz (transcriptional coactivator with pdz-binding motif). as funções biológicas de yap e taz são conhecidas em vários tecidos. na pele, por exemplo, yap é altamente expresso no núcleo de células epidermais progenitoras na camada basal e esta expressão apresenta um declínio com a idade. entretanto, seu papel na regeneração do folículo piloso ainda não é claro. considerando estes aspectos, este projeto de pesquisa visa estudar o efeito do meio condicionado e das vesículas extracelulares das cems no ciclo e regeneração do folículo piloso humano, além de investigar a modulação das vias de sinalização wnt/beta-catenina e hippo/yap-taz a fim de compreender os mecanismos moleculares e celulares pelos quais essas células podem regular o processo de manutenção do folículo piloso, e assim identificar alvos terapêuticos e possibilitar o desenvolvimento de novos tratamentos. para isso, serão realizadas análises em células tronco epidermiais e células da papila dérmica derivadas do folículo piloso, através de ensaios in vitro e ex-vivo(culturas organotípicas).