A pesquisa está sendo desenvolvida para compree...a pesquisa está sendo desenvolvida para compreendermos mais a respeito de uma doença chamada tuberculose. a tuberculose é uma doença que pode atingir vários tecidos do corpo, ocorrendo principalmente nos pulmões. o agente causador da tuberculose é o mycobacterium tuberculosis ou bacilo de koch, que é capaz de infectar diferentes células do sistema imune, como macrófagos, neutrófilos e células dendríticas. no entanto, não existem dados suficientes a respeito da interação da micobactéria com células que vivem na medula óssea e no sangue, chamadas células tronco e progenitores hematopoiéticos humanos. o objetivo geral do presente projeto é estudar como as bactérias do gênero mycobacterium afetam o desenvolvimento, ativação e função de distintas populações mieloides humanas. os resultados obtidos nesta pesquisa podem ajudar no entendimento da tuberculose e, no futuro, ajudar a desenvolver novas estratégias terapêuticas direcionadas ao hospedeiro. objetivos o objetivo da presente proposta é investigar se hspcs e séries mieloides humanas são um nicho durante a infecção por mycobacterium sp. objetivos específicos: 1 – caracterizar a infecção de hspcs humanas por bactérias do gênero mycobacterium. dados preliminares utilizando mtb fluorescente mostraram que cerca de 30% das células cd34+(hspcs) da fração de células mononucleares do sangue periférico humano (pbmc) estão associadas a micobactéria (cepa laboratorial h37rv). utilizando cd34+ purificadas do sangue de córdão umbilical (cb) obtidas junto à empresa stem cell technologies, observamos por microscopia confocal a presença da micobactéria no interior das células, demonstrando que hspcs humanas podem ser infectadas por mtb. 2- determinar como ocorre a diferenciação de hspcs humanas frente a infecção por m. tuberculosis. dados preliminares deste estudo mostraram um aumento na expressão de cd38, hla-dr, cd4 e cd64 em cd34+ de pbmc humana, cb e medula, expostas a micobactéria, sugerindo diferenciação para progenitores da linhagem granulocítica/monocítica. utilizando cd34+ purificadas de cb, observou-se que células expostas a mtb produziram maior quantidade de granulócitos (cd11+cd66b+) e monócitos (cd11b+cd14+) em relação ao controle. 3- investigar quais moléculas de mycobacterium sp. e do hospedeiro estão envolvidas na diferenciação das hspcs. os resultados que serão obtidos no item 2 são de grande relevância, porém carecem de informações a cerca de como a micobactéria modula a biologia das hspcs. para investigar o mecanismo que está ocorrendo no nosso sistema, usaremos duas abordagens não excludentes; uma investigando quais moléculas de mtb participam na ativação das hspcs e outra focando nos fatores produzidos pelo hospedeiro. no futuro, os dados obtidos durante a execução deste objetivo poderão ser correlacionados com dados clínicos de pacientes com tuberculose e auxiliar no desenvolvimento de terapias direcionadas ao hospedeiro. 4- análise do perfil de resposta de células adultas derivadas de hspcs expostas a mtb. células tronco hematopoiéticas recebem um conjunto de sinais em seu nicho, sendo esses responsáveis por manter suas caraterísticas de quiescência, como de ajustar a frequência de cada população de célula adulta gerada. supõem-se que a exposição dessas células a estímulos provenientes da infecção por mtb pode além de comprometer o balanço na produção das células adultas, como também alterar o seu funcionamento. partindo desse contexto, pretende-se avaliar a expressão global de genes como também realizar ensaios funcionais nas populações mieloides (granulócito/monócito) derivadas de hspcs expostas a mtb.