Os métodos microbiológicos clássicos, também co...os métodos microbiológicos clássicos, também conhecidos como métodos dependentes de cultivo são utilizados para identificar e quantificar bactérias probióticas em matrizes alimentares. entretanto, espécies de lactobacillus, especialmente os membros pertencentes ao grupo l. casei (l. casei, l. paracasei e l. rhamnosus) são frequentemente difíceis de serem diferenciados pelas técnicas clássicas, uma vez que apresentam necessidades nutricionais e de crescimento semelhantes. como uma alternativa as técnicas clássicas, os métodos conhecidos como independentes de cultivo tem sido propostos. esses métodos são baseados em análises diretas de dna ou rna extraído da matriz alimentar. a reação em cadeia da polimerase quantitativa (qpcr) tem representado a técnica base dos métodos independentes de cultivo.porém a incapacidade de diferenciar células viáveis e não viáveis tornou-se um grande inconveniente, uma vez que o dna é capaz de persistir no ambiente mesmo após as células perderam a viabilidade. uma maneira de discriminar dna de células viáveis e não viáveis consiste no uso de agentes intercalantes de dna, tais como monoazida de propídio (pma). o uso de pma em conjunto com a técnica qpcr tem sido proposto para a quantificação específica de células viáveis em diversas comunidades microbianas. diante disso, o presente estudo tem como objetivo monitorar a viabilidade celular de l. paracasei em alimentos utilizando ensaio pma-qpcr e desenvolver ensaio qpcr espécie-específicos com novos iniciadores para l. paracasei.