Os poli(hidroxialcanoatos) apresentam proprieda...os poli(hidroxialcanoatos) apresentam propriedades termoplásticas e mecânicas próximas às do polipropileno, podendo ser produzidos biotecnologicamente a partir de microrganismos. seu principal representante é o poli(3-hidroxibutirato). muitos são os microrganismos produtores de p(3hb) e a espécie ralstonia eutropha é uma das que apresenta condições mais favoráveis à produção. um dos maiores desafios para a produção de phas é a redução dos custos ao mesmo nível dos congêneres produzidos a partir de petróleo. para tanto, ganhos de escala de produção, rotas tecnológicas otimizadas e a intensificação do uso de fontes renováveis de matérias-primas e energia de baixo custo tem atraído a atenção no seu desenvolvimento. além do uso dos recursos fósseis para a produção de plásticos, nossa economia e estilo de vida demandam do uso desses recursos para transportes e materiais combustíveis. entretanto, tem aumentado a preocupação acerca do custo desses combustíveis, disponibilidade sustentável, e impacto no aquecimento e poluição global. neste cenário, o biodiesel e o bioetanol aparecem como uma alternativa promissora de combustíveis renováveis para atender à demanda. o mercado do biodiesel é crescente, com uma projeção de sua produção chegar a 37 bilhões de galões até 2016. o processo de produção do biodiesel envolve a transesterificação de óleos vegetais, que contenham triacil gliceróis com metanol ou etanol na presença de álcalis ou ácido para formar biodiesel e glicerol como coproduto. para cada 1 kg de biodiesel produzido, são obtidos aproximadamente 0,1 kg de glicerol. o aumento da produção de biodiesel tem resultado em excessos de glicerol com significante parcela na diminuição do custo do glicerol bruto simultaneamente com a diminuição de sua demanda. a utilização biológica desse glicerol pode servir como matéria prima para diversos processos fermentativos incluindo a produção de butanol, ácido propiônico e p(3hb), entre outros. no processo de produção de bioetanol, a partir da cana-de-açúcar, após a fermentação, o caldo fermentado (vinho ou mosto fermentado) é submetido ao processo de destilação para a obtenção do produto final. durante o processo de destilação, o corpo de fundo da coluna recebe o nome de vinhaça. tanto do ponto de vista qualitativo quanto quantitativo, a vinhaça representa a principal água residuária do setor sucro energético, uma vez que é produzida na proporção de aproximadamente 12 litros para cada litro de etanol produzido pelos processos convencionais de fermentação utilizados no brasil. a valorização da vinhaça, pelo desenvolvimento de um processo que utilize este resíduo como substrato para obtenção de um produto com alto valor agregado como os biopolímeros biodegradáveis, contribui com um valor adicional à produção de etanol, além de resolver um problema ecológico e ambiental referente ao descarte deste subproduto. r. eutropha dsm545 microrganismo é capaz de crescer e produzir p(3hb) a partir de vinhaça. porém, em função da baixa concentração de carbono presente neste resíduo, se faz necessária a utilização de uma fonte de carbono adicional, assim a utilização do glicerol se enquadra neste cenário, uma vez que r. eutropha é capaz de assimilar esse substrato. em trabalho do nosso grupo de pesquisa, realizou-se o melhoramento de r. eutropha, através da expressão de dois genes responsáveis pelo consumo do glicerol em escherichia coli: glpf e glpk, que codificam uma enzima de transporte facilitadora e a glicerol quinase (atua na fosforilação do glicerol a glicerol 3-fosfato), respectivamente, obtendo a cepa recombinante r. eutropha_glpfk. ao analisar comparativamente o crescimento de r. eutropha_glpfk com r. eutropha, em meio contendo glicose, os resultados mostraram que a expressão dos genes glpfk não interferiu no desempenho desse microrganismo nesse substrato e passou a consumir o glicerol de forma mais eficiente. este projeto tem como objetivo avaliar a utilização de subprodutos provenientes da indústria de biocombustíveis: vinhaça e glicerol, por ralstonia eutropha recombinante (r. eutropha_glpfk), quanto ao crescimento celular e à produção de p(3hb).