Atualmente, o brasil é o segundo maior produtir de etanol do mundo. o etanol é um biocombustível renovável que pode reduzir nossa dependência da gasolina, de origem fóssil. a produção no brasil ocorre através da fermentação do caldo e melaço da cana-de-açúcar (saccharum oficinarum) mediado pela levedura saccharomyces cerevisae. entretanto, a biomassa lignocelulósica oriunda da plantação de cana para a produção do etanol é pouco aproveitada. na biomassa lignocelulósica, encontra-se a xilose, segundo açúcar mais abundante na natureza. a conversão deste açúcar a etanol pela s. cerevisiae é de grande interesse para indústria. para isso, modificações genéticas já foram estabelecidas para sua utilização pela s. cerevisiae. apesar disso, o processo como um todo necessita de melhorias, e a internalização da xilose é um passo limitante. sabe-se que, em s. cerevisiae, a xilose é internalizada por transportadores da família hxtp através de um processo de difusão facilitada. em nosso grupo de pesquisa foi realizado um experimento de engenharia evolutiva utilizando uma levedura com todos genes que codificam para os transportadores hxt deletados (hxt-null), com exceção do gene hxt2, sobre-expresso pelo promotor de expressão constitutiva pgk. após a engenharia evolutiva, a levedura apresentou melhoria no consumo da xilose em ensaios de crescimento celular e, através de sequenciamento, foi descoberta uma mutação no gene stb5. este gene é um fator de transcrição tipo dedo de zinco envolvido com a regulação da via das pentose-fosfato e a produção de nadph pela levedura. assim, no presente trabalho, buscou-se caracterizar os efeitos desta mutação através da deleção do gene stb5 das linhagens evoluídas e inserção na levedura parental através de vetor, a fim de avaliar o fenótipo adquirido. nossos resultados demonstram que a levedura evoluída consegue consumir parcialmente a xilose não só em crescimento, mas também em ensaios de fermentação. entretanto, após a deleção do gene, o mesmo persistiu no genoma. uma análise de citometria de fluxo revelou a autodiploidização do genoma das leveduras parental e evoluída. então, mesmo após a deleção da segunda cópia do gene, o mesmo ainda estava presente. uma análise de expressão relativa demonstrou que o stb5 continuava sendo expresso, mesmo após a deleção de duas cópias em seu genoma. portanto, a levedura evoluída apresentou mais do que duas cópias do gene stb5 em seu genoma, impedindo a deleção completa deste gene e a correlação entre o gene mutado e o fenótipo adquirido.