Neisseria gonorrhoeae tem apresentado uma rápida e extraordinária capacidade de desenvolver resistência a todos os antimicrobianos introduzidos para o tratamento durante os últimos 70-80 anos. o presente estudo se constitui em uma análise retrospectiva da sensibilidade antimicrobiana, dos determinantes moleculares da resistência antimicrobiana e da genotipagem por ng-mast de 153 isolados clínicos de n. gonorrhoeae circulantes na grande florianópolis no período de 2008-2016. a concentração inibitória mínima (mic) foi determinada pelo método de ágar diluição para os antimicrobianos: penicilina, tetraciclina, ciprofloxacino, azitromicina, ceftriaxona e cefixima. detecção da enzima beta-lactamase foi realizada pelo método de nitrocefina em disco. foram detectadas altas taxas de resistência à penicilina (26,1%), tetraciclina (41,2%) e ao ciprofloxacino (52,3%). resistência à azitromicina foi detectada em 5,2% dos isolados. todos os isolados de n. gonorrhoeae foram sensíveis às escs (cefixima e ceftriaxona). no entanto, 8,5% (n=13) apresentaram mic=0,125¿g/ml para cefixima, um log abaixo do ponto de corte de resistência estabelecido pelo eucast. produção da enzima ¿-lactamase foi detectada em 12,4% dos isolados e um deles apresentou o plasmídeo toronto/rio carreando o alelo blartem-135r. resistência plasmidial à tetraciclina foi observada em 5,2% dos isolados e ambos os genes tetm americano e holandês foram identificados. nos anos de 2013-2016 a resistência à penicilina foi quase 2,5 vezes maior que no período de 2008-2012. a resistência à tetraciclina foi alta em todo o período estudado. a resistência ao ciprofloxacino foi elevada desde os primeiros anos do estudo e aumentou significativamente ao longo dos nove anos (p < 0,001). mutações na região qrdr de gyra e parc foram observadas em 87,5% dos isolados resistentes ao ciprofloxacino. sessenta e quatro diferentes sts foram determinados, 15 clusters foram identificados e 19 sts foram descritos pela primeira vez. os sts mais prevalentes foram: st225 (n=11), st2992 (n=11) st1582 (n=10), st338 (n=7), st1407 (n=4), st2202 (n=4) e st6827 (n=4). trinta e três isolados permaneceram com sts desconhecidos. dois genogrupos g225 e g1407 foram formados. o genogrupo g225 foi significativamente associado à resistência ao ciprofloxacino (p<0,001) à penicilina (p=0,016) e à tetraciclina (p< 0,001) enquanto o genogrupo g1407 foi estatisticamente associado com mic=0,125¿g/ml para cefixima (p=0,001), resistência ao ciprofloxacino (p < 0,001), à penicilina (p=0,016) e à tetraciclina (p< 0,001). isolados que compartilharam o mesmo alelo tbpb 29 foram significativamente associados com resistência à azitromicina (p= 0,008) e à penicilina (p= 0,035). o st338 foi associado com resistência plasmidial à penicilina (gene blartem-1r) (p<0,001) e à tetraciclina (tetm) (p= 0,006), enquanto o cluster que compartilhava o mesmo alelo tbpb 137, foi associado à resistência plasmidial à tetraciclina (gene tetm). os resultados do presente estudo demostraram altas taxas de resistência à penicilina, à tetraciclina e ao ciprofloxacino associadas à persistência e disseminação de linhagens gonocócicas com resistência ao ciprofloxacino e resistência cromossômica e plasmidial à penicilina e à tetraciclina. além disso, ressalta-se a importância do estabelecimento da vigilância para monitorar possíveis mudanças no perfil de sensibilidade da ceftriaxona e azitromicina, atualmente utilizadas no tratamento da gonorreia no brasil