A tuberculose (tb) é uma doença infectocontagiosa causada por bactérias do complexo mycobacterium tuberculosis. a cultura é o método padrão-ouro no diagnóstico laboratorial de tb, mas o resultado é obtido em até oito semanas em meio de cultura sólido e em até seis semanas em meio de cultura líquido. a baciloscopia apresenta resultado rápido, porém sua sensibilidade é baixa, especialmente na tb extrapulmonar. uma boa alternativa é a utilização de testes moleculares, como por exemplo, o teste xpert® mtb/rif. além disso, é importante o desenvolvimento de metodologias in house, que tornam o custo mais acessível. este trabalho foi dividido em três capítulos experimentais (ce), sendo o ce-i um estudo descritivo retrospectivo para avaliação do teste xpert® mtb/rif em amostras de rotina do hospital universitário da ufsc, o ce-ii um estudo descritivo prospectivo analisando os dados clínicos e epidemiológicos dos participantes, bem como a avaliação do teste xpert® mtb/rif em reação à cultura sólida e líquida e aplicação de metodologias de epidemiologia molecular diretamente de restos de reação do teste xpert® mtb/rif e o ce-iii o desenvolvimento e a otimização de uma qpcr para diagnóstico da tb utilizando sondas de hidrólise. na cultura líquida e na cultura sólida houve o crescimento de 17/19 e 18/19 amostras pulmonares e 3/4 e 4/4 amostras extrapulmonares de pacientes com tb. a tosse por mais de duas semanas, a perda de peso, a sudorese noturna e o contato prévio com pessoas com tb foram significativamente mais presentes em participantes com tb pulmonar (cultura positiva) do que em participantes sem tb pulmonar (cultura negativa). a sensibilidade da baciloscopia nas amostras pulmonares variou entre 70 e 80%, exceto para os participantes com tb prévia, onde foi obtido 100% se sensibilidade. em amostras extrapulmonares a sensibilidade da baciloscopia foi baixa. já o teste xpert® mtb/rif teve sensibilidade e especificidade acima de 95% em amostras pulmonares. apesar da alta especificidade, a sensibilidade em amostras extrapulmonares do teste xpert® mtb/rif ficou próxima a 40%. foi possível obter os perfis do miru-15 a partir do dna genômico presente nos restos de reação em amostras que amplificaram no xpert® mtb/rif com cq menor ou igual a 24, mas os perfis do spoligotyping foram obtidos com sucesso somente a partir do isolado clínico. a qpcr in house desenvolvido apresentou ótima performance analítica, especialmente nos limites de detecção, que foram de 4,7 cópias, 11,8 cópias e 23,6 cópias por reação, respectivamente para os alvos is6110, is1081 e senx3.