Aditivos alimentares são empregados na nutrição animal e desencadeiam múltiplas respostas benéficas ao organismo dos peixes. o viligen™ (alltech®, eua) é um aditivo alimentar que contém butirato de sódio, levedura hidrolisada e proteinato de zinco desenvolvido com o propósito de promover a saúde intestinal em animais de produção. o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da suplementação dietética deste aditivo 1) na morfologia e integridade intestinal, 2) na barreira intestinal, por meio da quantificação da proteína claudina-2; em juvenis de tilápia-do-nilo (oreochromis niloticus). o ensaio de dose-resposta durou 60 dias, onde 840 peixes (peso médio inicial de 1,98 g) foram distribuídos em 30 unidades experimentais (200 l), pertencente a um sistema de recirculação com temperatura controlada em 28 °c. os animais foram alimentados com dietas contendo níveis crescentes de inclusão de viligen™ (0,00; 0,60; 1,20; 2,40 e 4,80 g kg-1), testados em seis repetições. para analisar as alterações morfológicas ou na estrutura da barreira física intestinal, a porção medial do intestino dos peixes foi analisada com auxílio da microscopia eletrônica de transmissão e de varredura. além disso, quantificou-se a proteína da junção oclusiva claudina-2 através da técnica de western blot. os dados de morfologia intestinal e da proteína claudina-2 foram submetidos à análise de regressão polinomial para determinação do melhor nível de inclusão de viligen™ nas dietas, a um nível de significância de 5%. nas eletromicrografias detectou-se diferença significativa na altura das microvilosidades, as quais apresentaram uma resposta quadrática ao aumento dos níveis dietéticos de viligen™. a maior altura das microvilosidades e melhor desenvolvimento das pregas intestinais foi com a inclusão de 2,50 g kg-1 e 2,40 g kg-1 do aditivo na dieta, respectivamente. a integridade macroestrutural foi notavelmente diferente entre os peixes alimentados com dietas contendo diferentes doses do aditivo. o intestino das tilápias suplementadas com 2,40 g kg-1 apresentaram a melhor integridade do tecido intestinal, com menor fusão das pregas intestinais, sem a presença de deformidades e lesões, indicando que essa dose preveniu ou reparou possíveis danos intestinais. já os peixes que não receberam suplementação e os que receberam a maior suplementação (4,80 g kg-1) apresentaram maior deformidade e fusões das pregas, respectivamente. a quantificação da proteína da junção claudina-2 não foi significativamente afetada pela suplementação. por fim, conclui-se que a suplementação dietética do aditivo viligen™ a 2,50 g kg-1 na dieta melhora a morfologia intestinal e a integridade do epitélio do intestino de juvenis de tilápia-do-nilo, sem alterar a barreira física intestinal.