Introdução. bidens pilosa l. é uma planta considerada medicinal que contém poliacetilenos presumivelmente responsáveis por ações antitumorais. as quinonas, como a juglona, também compreendem uma classe de substâncias de interesse por seu potencial antitumoral. além disto, evidências indicam que a associação de ascorbato com algumas quinonas pode potencializar a atividade antitumoral. objetivos. avaliar o efeito antitumoral do extrato de b.pilosa obtido pela tecnologia supercrítica, a fim de obter um extrato rico em poliacetilenos (sfe) com atividade superior em comparação ao extrato obtido por maceração hidroetanólica (hce). testar a administração de juglona isoladamente ou em associação ao ascorbato em células t24 pela citotoxicidade; caracterizado o mecanismo de morte celular induzido, indução de estresse oxidativo, efeito antiproliferativo e preliminarmente, anti-invasivo in vitro. por fim, avaliar a administração de juglona e ascorbato em associação a quimioterápicos convencionais, doxorrubicina e cisplatina. metodologia. a composição fitoquimica dos extratos foi avaliada por cromatografia em camada delgada e espectrofotometria uv-vis. a citotoxicidade para células mcf-7 e t24 foi avaliada pelo ensaio do mtt. o potencial lesivo sobre o dna foi avaliado in vitro pela motilidade eletroforética de dna plasmidial e imunoeletroforese para fosforilação da histona gama-h2ax em células t24. foram avaliados marcadores de danos oxidativos, geração celular de eros e conteúdo de gsh, também a fosforilação do fator de iniciação eucariótico 2 eif2α. foi avaliada a morfologia das células em processo de morte, sendo também verificada a ativação de caspases por espectrofluorimetria e clivagem da poli (adp-ribose) polimerase (parp) por imunoeletroforese. a atividade antiproliferativa foi medida pelo ensaio de formação de colônias. a inibição da motilidade celular foi investigada pelo ensaio de migração. a atividade antitumoral in vivo foi medida em camundongos balb-c portadores de tumor ascítico de ehrlich. resultados. os espectros sobre os constituintes majoritários de sfe apresentaram bandas típicas de poliacetilenos com picos de absorção na faixa do uv registrados em 208, 269 e 334 nm. a citotoxicidade in vitro foi dependente da concentração dos extratos. às 24h, a ci50 foi 811 e 437 μg/ml, respectivamente para hce e sfe, reduzindo para 291 μg/ml às 48h, no caso de sfe. às 24h, a ci50 foi 28,5 μm para juglona, reduzindo para 6,3 μm, quando associada ao ascorbato 1 mm. a citotoxicidade da cisplatina chegou a dobrar devida sua associação com juglona e ascorbato. hce causou danos no dna em 160 μg/ml, ao passo que 40 μg/ml de sfe causaram danos equivalentes. juglona iniciou danos sobre o dna em 20 μm, ao passo que 5 μm associados ao ascorbato 1 mm causaram danos equivalentes. a juglona induziu à geração celular de eros e consumo de gsh; iniciando fosforilação do eif2α que indica estresse de retículo endoplasmático. estes efeitos foram potencializados em até 4 vezes pela associação ao ascorbato. a juglona sozinha ou associada ao ascorbato não causou ativação de caspases; corroborando a morfologia das células t24 em processo de morte, o processo induzido provavelmente está mais relacionado à necrose. em tratamentos subletais, a juglona diminuiu a proliferação e a motilidade de células t24, ambos os processos potencializados pela associação ao ascorbato, que induziu à morte clonogênica. finalmente, os ensaios in vivo indicaram que ambos os extratos de b. pilosa apresentaram atividade, mas sfe causou redução superior do volume de líquido ascítico e células compactadas (4 ± 1 e 1 ± 0,4 ml, respectivamente), ao mesmo tempo em que resultou em maior aumento no tempo de sobrevida (~31%) em comparação aos animais do controle negativo. a inibição do crescimento tumoral determinada para hce foi de cerca de 40%, ao passo que esta determinação ultrapassou 60% no caso de sfe. conclusão. a extração com fluido de co2 supercrítico é uma alternativa para a obtenção de um extrato de b. pilosa rico em poliacetilenos citotóxicos com atividade antitumoral superior em comparação ao extrato obtido por maceração hidroetanólica. o ascorbato potencializa a citotoxicidade, o efeito antiproliferativo e inibidor da motilidade de células t24 in vitro da juglona. os achados deste trabalho levam a sugerir que a dose do tratamento feito com juglona pode ser ajustada, em termos de redução da mesma, em até 4 vezes, se a juglona for administrada em associação ao ascorbato.