A crista neural (cn) constitui uma população de células que emergem a partir das pregas dorsais do neuroepitélio durante a neurulação. estas células migram ao longo de todo o eixo antero-posterior embrionário dos vertebrados até encontrarem seus locais definidos onde irão diferenciar em diversos derivados neurais e mesenquimais. as células da cn cefálica (cnc) e da cn truncal (cnt) podem dar origem a neurônios e células gliais do sistema nervoso periférico, melanócitos e células endócrinas. diferentemente do que ocorre com a cnc, a cnt possui uma limitada capacidade de originar elementos mesenquimais in vivo. entretanto, sob determinadas condições in vitro, a cnt pode originar fenótipos mesenquimais. até o momento, a maior parte dos estudos com a cnt foram realizados sobre substratos bidimensionais (2d), geralmente revestidos moléculas isoladas da matriz extracelular (colágeno, laminina, fibronectina) ou sobre monocamadas de fibroblastos embrionários (3t3). atualmente, sabe-se que este tipo de ambiente não reflete a complexa fisiologia dos tecidos in vivo. no presente estudo nós realizamos cultivos de células isoladas da cnt sobre um extrato solúvel da membrana basal, comumente denominado de matrigel. elaboramos uma metodologia que permitiu criar dois microambientes dentro do mesmo poço de cultivo: um ambiente bidimensional (2d) e um ambiente tridimensional (3d). verificamos que o matrigel permite a diferenciação dos principais fenótipos da cnt (neurais: células gliais, células musculares lisas, neurônios, melanócitos e mesenquimais: condrócitos). embora tenham sido observadas algumas variações na obtenção dos fenótipos descritos conforme o lote de matrigel utilizado, o uso de uma mistura destes lotes permitiu normalizar a frequência de poços de cultivo contendo cada tipo celular. além disso, 70% dos poços de cultivo apresentavam nódulos de cartilagem, os quais frequentemente se encontravam na região 3d. interessantemente, esta frequência de condrócitos detectada utilizando um microambiente 3d de matrigel, resultou ser muito maior quando comparado a trabalhos anteriores realizados sobre ambientes 2d convencionais. estes dados sugerem que o matrigel pode ser um ótimo substrato para estudar a diferenciação e multipotencialidade das células da cn.