
Universidade Federal de Santa catarina (UFSC)
Programa de Pós-graduação em Engenharia, Gestão e Mídia do Conhecimento (PPGEGC)
Detalhes do Documento Analisado
Centro: Não Informado
Departamento: Não Informado
Dimensão Institucional: Pós-Graduação
Dimensão ODS: Social
Tipo do Documento: Dissertação
Título: DESENVOLVIMENTO E APLICAÇÃO DE UM SISTEMA CELULAR REPÓRTER PARA HERPES SIMPLEX VÍRUS E PADRONIZAÇÃO DE UMA PCR QUANTITATIVA PARA POLIOMAVÍRUS BK
Orientador
- THAIS CRISTINE MARQUES SINCERO
Aluno
- CLARISSA FELTRIN
Conteúdo
Pacientes imunodeprimidos podem apresentar infecções virais com evolução rápida, sintomatologias atípicas graves e muitas vezes fatais, sendo fundamental um diagnóstico precoce para estabelecimento do tratamento efetivo, redução da toxicidade e da resistência aos antivirais. hsv-1, hsv-2 e poliomavírus bk são vírus de importância clínica para imunodeprimidos e podem levar a rejeição de órgãos em transplantados. assim, o objetivo deste trabalho foi desenvolver um sistema celular repórter, utilizando a proteína fluorescente gfp, para hsv-1 e 2 e implantar uma qpcr utilizando amostras clínicas de pacientes transplantados renais para detecção de poliomavírus bk. o sistema celular repórter foi construído através da transfecção de células vero com o vetor pzsgreen1-1 ligado ao promotor icp10 (f3r3 e f4r3) da rr1 do hsv-2. a regulação da expressão da gfp via icp10 é dependente da infecção viral e acontece por meio da proteína viral transativadora vp16 e de fatores celulares oct-1 e hcf-1. a efetividade do sistema foi avaliada por infecção viral e pela aplicação de antivirais (aciclovir, ácido gálico, convalotoxina e extrato de uncaria sp.) e candidatos antivirais inativos (extrato de passiflora edulis e derivados de cardenolídeos). o sistema repórter f4r3 zsgreen1-1 expressou gfp em função da infecção por hsv-1 e 2, a qual foi detectada por microscopia de fluorescência e/ou citometria de fluxo. em análise por citometria de fluxo, a fluorescência do sistema repórter correlacionou-se diretamente com os títulos virais (moi de 4,0 x10-3 a 3,3 x10-4, ou seja, 1 partícula viral a cada 250 a 3000 células), o sistema manteve a capacidade de expressão da gfp na presença de agentes sem propriedade antiviral e não expressou fluorescência quando tratado com antivirais. o sistema f4r3 zsgreen1-1 mostrou-se um sistema funcional com possíveis aplicações para diagnóstico clínico, para elaboração de testes de resistência aos antivirais e para a pesquisa de novos medicamentos. a qpcr para poliomavírus bk foi implantada utilizando amostras de dna cedidas pelo hemosc com iniciadores dirigidos para o antígeno t viral. o limite de detecção foi de 18 cópias genômicas/ reação com quantificações variando entre 9,8 x 105 a 6,7 x 107 cópias genômicas/ ml. a qpcr foi efetiva para análises de amostras clínicas e apresentou limite de detecção suficiente para avaliação de risco de nefropatia em transplantados renais.
Índice de Shannon: 3.93962
Índice de Gini: 0.93156
ODS 1 | ODS 2 | ODS 3 | ODS 4 | ODS 5 | ODS 6 | ODS 7 | ODS 8 | ODS 9 | ODS 10 | ODS 11 | ODS 12 | ODS 13 | ODS 14 | ODS 15 | ODS 16 |
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4,24% | 5,98% | 12,48% | 6,77% | 4,97% | 5,45% | 7,09% | 6,17% | 7,87% | 4,23% | 6,67% | 4,94% | 5,95% | 6,50% | 4,15% | 6,55% |
ODS Predominates


4,24%

5,98%

12,48%

6,77%

4,97%

5,45%

7,09%

6,17%

7,87%

4,23%

6,67%

4,94%

5,95%

6,50%

4,15%

6,55%