A bananeira é a segunda fruteira mais cultivada do mundo, sendo o brasil o quinto no ranking, com 6,8% da produção mundial de banana. no ano de 2014, a estimativa da área de produção brasileira foi de 490,1 mil hectares, produção de 7,18 milhões de toneladas de frutas (epagri/cepa, 2014). nas últimas décadas, a produção se expandiu na maioria dos países produtores; passou de 35 milhões para 102 milhões de toneladas entre as safras 1978 e de 2012, parte deste aumento de produção se deve ao avanço tecnológico, principalmente devido disponibilidade de material genético diversificado e de mudas com valor agregado, principalmente qualidade fitossanitária obtida através de técnicas biotecnológicas. apesar das biofábricas terem protocolos de micropropagação bem sucedidos, os mesmos não são suficientes para atenderem a demanda com qualidade e quantidade de mudas. nos últimos anos os sistemas de propagação, em larga escala, não atingiu o número de mudas desejadas, mesmo com a utilização de biorreatores de imersão temporária, o qual tem sido associado ao aumento dos riscos de surgimento de variantes somaclonais. o presente trabalho teve por objetivo mostrar o comportamento das culturas in vitro de musa acuminata (aaa) cv. grande naine e de musa acuminata x musa balbisiana (aab) cv. prata catarina, submetidas a alterações no protocolo de micropropagação, comumente utilizado em biofábricas, visando obter maior taxa de multiplicação. utilizando-se de material vegetal proveniente da coleção da epagri/eei, o trabalho foi dividido em duas etapas: fase de estabelecimento de cultura e fase de multiplicação. na fase de estabelecimento, utilizou-se como meio base a formulação ms, acrescida de 1 mg.l-1 de bap e 1 mg.l-1 de ana, tendo como variáveis nos tratamentos propostos: aumento do tempo de cultivo in vitro; alterações de concentração de sais e adição de diferentes fitormônios. para a fase de multiplicação utilizou-se as culturas provenientes da fase de estabelecimento, em cinco subcultivos de 30 dias, utilizando a formulação do meio ms e tendo como variáveis: alteração no estado físico (sólido/liquido), adição de bap e adição de bap/ana. o meio ms, acrescido de 2,5 mg.l-1 de bap promoveu a maior taxa de multiplicação, em ambas as cultivares estudadas. as melhores taxas de multiplicação quando consideradas fases de estabelecimento e multiplicação, para cultivar grande naine, foram obtidas em meio ms, acrescido de 1 mg.l-1 de bap e 1 mg.l-1 de ana por 90 dias em estabelecimento de cultura, utilizando na sequencia meio ms com 2,5 mg.l-1 de bap para multiplicação em 5 subcultivos de 30 dias consecutivos, alcançando taxas de multiplicação de 356 brotos por explante inicial, superior em 5 vezes ao obtido no tratamento similar ao praticado em biofábricas. quanto a cultivar prata catarina o desempenho obtido não foi superior ao alcançado em biofábricas e os tratamentos não apresentaram diferenças estatísticas significativas. foi utilizado meio ms com 50% dos sais da formulação para prover crescimento e enraizamento. na fase de aclimatização, o método utilizado foi eficiente gerando número total de mudas para as cultivares grande naine e prata catarina de 8.995 e 3.911, respectivamente. o estudo indicou que alterações na fase de estabelecimento de cultura resultam em aumento da taxa de multiplicação para o cv. grande naine, enquanto que para o cv. prata catarina não apresenta efeito significativo.