A análise histopatológica do tecido ósseo ou mineralizado apenas é possível após a desmineralização tecidual que consiste em imergir as amostras em soluções ácidas ou quelantes. este trabalho teve como objetivo testar diferentes procedimentos de desmineralização dos ossos, a fim de estabelecer o melhor valor destes em amostras fixadas em formalina e embebidos em parafina. foram utilizados 130 discos de fêmur obtidos de 10 ratos wistar machos adultos e distribuídos aleatoriamente em 5 grupos para desmineralização em soluções de ácido nítrico 5%, 10% e 20% (grupo i), ácido fórmico 10%, 20% e 30% (grupo ii), ácido acético 10%, 20% e 30% (grupo iii), edta ph 7,4 a 5%, 10% e 20% (grupo iv) e solução de anna morse (grupo v). cortes seriados de 3 ?m de espessura foram coradas com hematoxilina-eosina (h&e) para calcular a porcentagem de lacunas ocupadas por osteócitos. os cortes histológicos também foram coradas com tricrômio de masson e picrosirius sob polarização e uma análise semi-quantitativa foi aplicada para verificar a integridade do tecido muscular adjacente ao osso e a preservação das fibras colágenas. foi calculado o tempo (dias) e o custo (dólares) para a realização da desmineralização completa para cada solução. o grupo i exigiu menor tempo e custo financeiro (0,8 a 5,7 dias). a porcentagem mais elevada de lacunas ocupadas por osteócitos foi encontrada na desmineralização com a solução de ácido acético 10% (95,64% ± 0,95), seguido por ácido acético 30% (87,52 ± 3,41%) e edta 5% (82,14% ± 4,02). grupos iii e iv necessitaram maior tempo para conclusão da desmineralização (48 a 79,8 dias). entre todas as soluções, o ácido nítrico 5% apresentou menor custo em comparação com outras soluções (p < 0,001), enquanto o ácido acético 30% teve maior custo para a conclusão da desmineralização. o grupo iv teve a maior integridade muscular e do colágeno tipo i e ii em relação aos demais grupos (p < 0.01). assim, concluímos que a desmineralização com ácido acético 10% foi o mais eficaz na preservação do tecido ósseo, enquanto o edta 5% foi o melhor na manutenção do colágeno e do músculo adjacente ao osso. ácido nítrico 5% mostrou melhor equilíbrio entre tempo e o custo como solução desmineralizadora.